作者：王佳曦; 孟祥宁; 刘改云; 赵育桢; 王哲; ...sirnarnaifak基因表达抑制
摘要：目的 应用RNA干扰技术，构建针对FAK的siRNA表达载体，抑制肺巨细胞癌细胞BE-1中FAK的表达。方法 依据设计siRNA的原则，针对人FAK的mRNA序列，设计并合成编码siRNA的两条寡核苷酸序列，经退火成互补双链，再克隆到pSilencer^TM 2．1-U6真核表达载体中构建重组体pSileneer-FAK，进行测序鉴定。然后转染重组体至BE-1细胞中，经G418筛选，以空质粒转染为对照，获得稳定转染克隆，运用Western印迹检测FAK基因的表达。结果 测序证实目的寡核苷酸片段已被克隆到pSilencer^TM 2．1-U6载体中，pSilencer-FAK转染细胞后，FAK基因在蛋白水平的表达量受到明显抑制。结论 成功构建了针对人FAK的siRNA表达载体，通过转染BE-1细胞，可有效抑制细胞中FAK的表达，为后续研究以及肺癌的基因治疗奠定了基础。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
