人早孕蜕膜基质细胞对育龄期女性外周血Treg的影响

作者：吴阿丽; 刘小云; 刘福民; 冯霞; 朱学文蜕膜细胞培养的逆转录聚合酶链反应t淋巴细胞调节性免疫耐受脂多糖类感染

摘要：目的：探讨人早孕蜕膜基质细胞（DSCs）对育龄女性外周血Treg细胞的影响。方法：分离培养育龄期女性外周血淋巴细胞（PBLC）;分离培养正常人早孕DSCs并传至第3代或第4代,后分为4组。1对照组：单纯培养PBLC;2共培养组：PBLC＋DSCs培养组;3脂多糖（LPS）刺激组：PBLC＋DSCs＋LPS培养组;4吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）阻断组：PBLC＋DSCs＋LPS＋PDTC培养组。蛋白质印迹法（Western blotting）检测核因子κB抑制因子α（IκBα）蛋白表达水平;逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测Fox P3 m RNA表达水平;流式细胞仪检测Treg细胞亚群比例。结果：分离培养的人原代DSCs的纯度大于95%。Western blotting和RT-PCR结果显示,共培养组IκBα蛋白、Fox P3 m RNA表达明显高于其余3组（P〈0.05）;与共培养组相比,LPS刺激组IκBα蛋白、Fox P3 m RNA表达降低（P〈0.05）,与LPS刺激组相比,PDTC阻断组IκBα蛋白、Fox P3 m RNA表达升高,但仍低于共培养组（P〈0.05）。流式细胞术检测显示,共培养组Treg细胞亚群比例高于其余3组（P〈0.05）;与共培养组相比,LPS刺激组Treg细胞亚群比例下降;PDTC阻断组Treg细胞亚群比例高于LPS刺激组,但仍低于共培养组（P〈0.05）。结论：人早孕DSCs能上调育龄期女性外周血淋巴细胞中Treg细胞亚群比例,加入LPS刺激后Treg细胞亚群比例下降,可能与级联活化IκB激酶,降解IκBα,活化NF-κB信号通路,从而抑制Fox P3表达增高有关。

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