人卵巢组织冷冻对印迹基因IGF-2/H19甲基化程度及表达的影响

作者：黄丽丽 王文军 李琳 李瑞岐 黄佳 杨冬梓卵巢低温保存甲基化基因生殖技术辅助

摘要：目的：探讨程序化冷冻和固相表面玻璃化冷冻对人卵巢组织中印迹基因胰岛素样生长因子2（IGF-2）／H19（一种非可读框架RNA）差异性甲基化区（DMR）CpG岛甲基化程度及两基因表达的影响。方法：15例因其他疾病而手术的患者，将病理检查剩余的卵巢组织切割成皮质小条后随机分配到新鲜组（F组）、程序化冷冻组（sF组）和固相表面玻璃化组（SSv组）。通过甲基化聚合酶链反应（MS—PCR）检测各组卵巢组织中IGF-2／H19CpG岛甲基化程度，并分别采用免疫组化法和原位杂交方法检测各组卵泡中IGF-2蛋白和H19RNA的表达情况。结果：F组、sF组和SSV组卵巢组织甲基化程度分别为26．46％，41．02％和33．09％，虽然sF组和SSV组的甲基化程度略高于F组，但差异无统计学意义。在新鲜和冻融后的卵巢组织中，各级别卵泡的卵母细胞和颗粒细胞胞质中均有IGF-2蛋白阳性表达，3组之间原始和初级卵泡IGF-2的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。原始卵泡的颗粒细胞和卵母细胞均可见到JH19RNA阳性表达，3组之间原始卵泡H19RNA的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：未检测到慢速程序化冷冻和快速固相表面玻璃化冷冻对印迹基因IGF-2／H19CpG岛甲基化程度的影响，亦未发现2种冷冻方法对原始和初级卵泡中IGF-2蛋白和H19RNA表达的影响。

注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社