作者:包仕尧; 王运良; 张志琳; 石向群gdnf基因克隆基因表达载体胶质细胞源性神经营养因子基因序列
摘要:目的:克隆大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)全长基因,构建真核细胞表达质粒。方法:从孕17d大鼠胚胎脑组织中提取RNA,参照《分子克隆实验指南》,合成cDNA第一、二链,加入引物PCR扩增目的基因,与pcDNA3质粒连接,构建表达质粒。结果:提取的总RNA经纯化后电泳出现18S和28S2个条带,PCR扩增目的基因为630bp的条带,测序结果为633bp。结论:正确地克隆了大鼠GDNF基因全序列,为进一步获得重组活性的GDNF蛋白奠定基础。
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