作者：丁克祥 董萍 杨永鹏 孙乐 孙哲 尹晴 韩晋...人神经肽y多肽合成单克隆抗体制备鉴定
摘要：目的：建立抗人神经肽Y（NPY）的单克隆抗体细胞株。方法：用合成的hNPY多肽偶联KLH免疫BALB／c小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2／0融合，用ELISA法筛选出阳性克隆，经克隆化后建立抗人NPY杂交瘤细胞株，并对得到的单抗进行亚类、效价、纯度、亲和常数以及结合位点的测定和分析。结果：获得了3株稳定分泌抗hNPY单抗杂交瘤细胞株，IgG亚类鉴定分别为IgG3、IgG2b、IgG1，腹水效价为1：20万～1：200万，纯化抗体效价为0．05μg／ml-0．0005μg／ml，4A8抗体纯度达到95％以上，抗体亲和常数分别为5．27×10^6L／mol、3．39×10^6L／mol、1．05×10^7L／mol，不同单抗配对经时间分辨免疫荧光法检测结果提示3株单抗是针对不同抗原决定簇。结论：成功制备了3株抗hNPY单抗，为研究NPY及其抗体在脂肪移植及肥胖治疗中的机制和应用奠定基础。
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