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C57BL/6J小鼠体外腭突悬浮培养过程中血小板衍化生长因子受体α的表达变化

作者:丛雯雯; 张岱尊; 肖文林; 薛令法; 许尧祥举报版权声明浏览:100

腭突悬浮培养
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摘要:目的构建C57BL/6J小鼠腭突体外培养模型,研究血小板衍化生长因子受体α(PDGFR-α)在小鼠腭突体外培养不同时间段的表达变化。方法应用悬浮培养法分别培养腭突24、36、48 h,体视显微镜及苏木素-伊红(HE)染色观察腭突发育情况。免疫组织化学检测腭突体外培养不同时间段组织中PDGFR-α的表达定位,Western blot检测腭突体外培养不同时间段组织中PDGFR-α的时空表达变化。结果体视显微镜和HE染色结果均显示,体外培养24 h,双侧腭突向中线方向靠近生长,间隙变窄;36 h,镜下观察到双侧腭突接触,HE切片观察到腭中嵴上皮缝的形成;48 h,镜下观察到双侧腭突融合,HE切片观察到腭中嵴上皮缝消失。PDGFR-α在腭突体外悬浮培养24 h时表达最高,36及48 h后逐渐降低。结论本实验改进的腭突体外悬浮培养方法模拟了腭突的体内发育环境,为应用体外腭突培养模型研究腭裂复杂的发病机制奠定了基础。笔者采用的体外悬浮培养方法证明腭突发育相关基因PDGFR-α在体外培养腭突的表达变化与其体内表达是一致的。

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