作者：苏恒; 刘红菊; 吴爱武艰难梭菌毒素bselex适配子亲和常数
摘要：目的 筛选和鉴定艰难梭菌毒素B适配子（Apt）。方法 体外合成80bp的单链DNA（ssDNA）随机文库,重组表达艰难梭菌毒素B蛋白,利用指数富集配体系统进化（SELEX）技术筛选艰难梭菌毒素B的核酸适配子。使用DNA MAN5.2.2.0软件和mfold软件筛选出的适配子序列进行同源性和二级结构的分析,并利用非竞争酶联免疫吸附试验（ELISA法）测定其亲和常数。结果 经过12轮筛选,文库中随机ssDNA与艰难梭菌毒素B的结合率从0.8%增加到39.6%,筛选出51条适配子,二级结构最稳定的是Apt-B20,其亲和常数为3.76×10~（-7）。结论 利用SELEX技术成功筛选出高亲和力的Apt,为临床上艰难梭菌感染的实验室快速诊断提供一定的参考依据。
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