作者：张婕婕; 杨自华抗线粒体抗体肝硬化自身免疫
摘要：目的改良构建M2型抗线粒体抗体（AMA-M2）靶基因三联体重组表达载体技术,建立检测AMA-M2的酶联免疫吸附法（ELISA）并进行评价。方法通过聚合酶链反应（PCR）扩增基因三联体BPO,构建表达载体pGEX-4T-1-BPO,转入大肠杆菌BL21表达,经异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导得到重组蛋白,并通过亲和层析纯化得到目的蛋白,建立ELISA检测AMA-M2。结果获得纯度大于95%的重组蛋白;检测326例临床样本,43例原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者中有41例呈AMA-M2阳性,灵敏度为95.3%（41/43）,特异度为98.2%（278/283）,PBC组与非PBC组的AMA-M2检出率差异有统计学意义（P〈0.05）。结论该改良技术获取的目的蛋白可以用于AMA-M2检测,AMA-M2对PBC的临床诊断具有较高的灵敏度和特异度。
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