作者：陈志忠; 李结敏; 陈尚良; 梁洁贞; 卢少芬...病毒灭活血浆亚甲蓝人外周血单个核细胞t淋巴细胞免疫功能
摘要：目的 利用人外周血单个核细胞（PBMC）研究用于血浆病毒灭活后残余的亚甲蓝是否对人体免疫细胞功能产生影响。方法 采用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离PBMC,在T细胞特异性刺激因子Anti-CD3/CD28存在的条件下,加或者不加不同浓度的亚甲蓝共培养,培养至72h,收集培养上清液,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞因子分泌情况;培养66h后,加入CCK-8染料继续培养4~6h,于A450处测定细胞增殖情况。结果 高浓度剂量亚甲蓝（1.25、2.5、5μmol/L组）对AntiCD3/28刺激PBMC的增殖均有明显抑制作用（P〈0.01）,其OD值由0.897±0.385分别降至0.632±0.334、0.524±0.254、0.445±0.287,呈一定的剂量依赖效应。高浓度亚甲蓝（1.25、2.5、5μmol/L组）可下调Anti-CD3/28诱导PBMC分泌细胞因子白细胞介素（IL）-17a、IL-10、γ-干扰素（IFN）-γ,且呈剂量依赖效应。1.25、2.5、5μmol/L的亚甲蓝影响PBMC分泌IL-17a,IL-17a水平由（406±57）pg/mL分别降至（276±38）、（192±31）、（134±24）pg/mL;影响PBMC分泌IL-10,IL-10水平由（184±15）pg/mL分别降至（132±13）、（110±12）、（42±8）pg/mL;影响PBMC分泌IFN-γ,IFN-γ水平由（4 512±187）pg/mL分别降至（2 876±143）、（2 234±153）、（1 988±112）pg/mL。结论 高浓度亚甲蓝（≥1.25μmol/L）对人PBMC的增殖以及分泌细胞因子功能有显著抑制作用,换而言之,血浆病毒灭活后残余浓度（≤0.33μmol/L）的亚甲蓝对PBMC免疫功能无明显影响,但该浓度的亚甲蓝对人纯T细胞免疫功能是否有影响需要进一步评估研究。
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