作者：陈智; 叶临湘伤寒沙门氏菌扩增片段长度多态性银染体系
摘要：目的 建立伤寒沙门氏菌AFLP—银染体系。方法 对EcoRⅠ和MseⅠ两种限制性内切酶用量、酶切时间、连接产物及预扩增产物的稀释倍数等进行研究。结果 建立了伤寒沙门氏菌AFLP-银染体系：在20μl的酶切体系中，含基因组DNA250ng，EcoRⅠ和MseⅠ各2．5U，37℃下酶切3h；21℃连接过夜；连接产物稀释10倍后进行预扩增；预扩增产物稀释50倍后再进行选择性扩增；选择性扩增完成后加等量Loading buffer，90℃变性3min，立即冰浴；在6％变性聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳分析；银染法检测PCR产物。结论 AFLP—银染体系有望在伤寒沙门氏菌的多态性研究和流行病学调查中发挥重要作用。
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