作者：牛力; 徐焱成; 郭敏人胰岛素基因糖尿病基因治疗壳聚糖
摘要：目的研究人胰岛素基因表达质粒在体外转染鼠成纤维细胞(NIH3T3)后对糖尿病大鼠血糖的影响.方法采用壳聚糖转染法将重组的人胰岛素基因表达质粒转染鼠成纤维细胞(NIH3T3),转染后72 h,经G418抗性筛选出阳性克隆并培养到第24 d,用免疫组织化学方法检测胰岛素的表达,同时用ELASA法监测转染后24 d的细胞培养液的胰岛素水平.并将阳性克隆大量扩增,注射至糖尿病大鼠腹腔内,并与转染空载体的对照细胞比较,观察在糖尿病大鼠体内的胰岛素表达及对血糖等变化的影响.结果转染PCMV.INS的NIH3T3细胞培养液的胰岛素水平明显高于未转染组(P＜0.01)及PCMV转染组(P＜0.01),未转染组与PCMV转染组细胞培养液的胰岛素水平无明显变化(P＞0.05).接受胰岛素表达载体细胞的糖尿病大鼠,血糖明显下降,体重逐渐恢复.结论人胰岛素基因能成功转染非胰岛β细胞,并表达目的基因使血糖水平下降说明基因治疗有望成为1型糖尿病的重要治疗手段,壳聚糖是一种很有前途的胰岛素基因载体.
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