作者：杜红阳 付海燕 马刚 包翠芬 秦书俭地黄多糖骨髓间充质干细胞notch1蛋白诱导神经样细胞
摘要：目的探讨地黄多糖诱导大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）分化为神经样细胞的作用,及其对Notch1蛋白表达的影响。方法以大鼠BMSCs为研究对象,取第3代细胞,分为对照组、β-巯基乙醇诱导组（5mmol/L BME）和地黄多糖诱导组（0.2 mg/mL）进行诱导实验,应用流式细胞仪检测诱导前后细胞生长周期改变情况,免疫细胞化学染色法检测神经标志物：神经巢蛋白（nestin）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和Notch1蛋白的表达,Western blot检测Notch蛋白胞内片段（NICD）的表达情况。结果流式细胞仪检测示地黄多糖诱导后G0/G1期细胞比例明显升高,而S＋G2/M期的细胞比例明显下降。免疫细胞化学染色显示,对照组不表达神经细胞标志物,各诱导组诱导后产生特异性神经细胞标志物表达。其中地黄多糖组nestin及NSE阳性细胞率高于β-巯基乙醇诱导组（P〈0.05）;GFAP阳性细胞率低于β-巯基乙醇诱导组,差异有统计学意义（P〈0.05）;免疫细胞化学染色示地黄多糖诱导组诱导前为Notch1蛋白强阳性或阳性染色,并随诱导时间延长阳性细胞逐渐减少。Western blot结果显示地黄多糖诱导组诱导分化24 h后细胞内NICD含量逐渐下降,到第5天时,低于诱导前水平,且仍明显低于对照组。结论地黄多糖可能通过抑制Notch1蛋白表达而诱导BMSCs向神经样细胞分化,且主要向神经元样细胞方向分化。
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