作者：肖扬; 张洹; 何冬梅端粒酶活性原代细胞asodnal反义寡核苷酸急性白血病凋亡起始密码子活细胞荧光显微镜
摘要：目的探讨端粒酶RNA(hTR)反义寡核苷酸(ASODN)对急性白血病(AL)原代细胞端粒酶活性及细胞凋亡的影响.方法应用与人hTR起始密码子互补的硫代ASODN处理AL原代细胞,用台盼蓝拒染的方法计数活细胞,用端粒酶重复扩增分析(TRAP)-PCR-ELISA检测法观察端粒酶活性的变化,用Giemsa染色、Hoechst33258+PI双染荧光显微镜检查及流式细胞仪检测凋亡细胞的发生.结果经hTR-ASODN作用后,AL原代细胞端粒酶活性明显受到抑制,并与ASODN的浓度和处理时间相关,10 μmol/L ASODN在作用72 h时端粒酶活性为(0.095±0.06),较细胞对照组(1.154±0.15)下调明显(P＜0.01);在作用第5天经荧光显微镜可观察到ASODN组细胞凋亡形态学变化.流式细胞仪检测到其凋亡率为(31.72±8.64),与细胞对照组的凋亡率(6.33±0.91)比较,差异有显著性(P＜0.01).结论hTR-ASODN可明显抑制AL原代细胞端粒酶活性并诱导其凋亡,hTR可能成为白血病基因治疗新靶点.
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