作者：高胜强; 喻凯; 陈潇; 罗建生肝卵圆细胞
摘要：目的探讨microRNA-21（miR-21）在TGF-β1引起的肝卵圆细胞（hepatic oval cell，HOC）上皮间质转化（epithelial mesenchymal transition，EMT）中的作用。方法体外培养大鼠肝卵圆细胞，用10 ng/mL TGF-β1刺激HOC 1、3、5、7 d后，Western blotting检测EMT相关蛋白（E-cadherin、N-cadherin和Vimentin）表达情况；用10 ng/mL TGF-β1刺激HOC 5 d后，实时荧光定量PCR检测miR-21的表达情况；分别用miR-21增强和抑制慢病毒转染HOC构建稳定的细胞株，PCR检测miR-21的表达情况；接着用TGF-β1刺激miR-21抑制慢病毒转染的HOC 5 d，Western blotting检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达；用miR-21增强慢病毒转染HOC后，Western blotting检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达。结果TGF-β1刺激HOC 1、3、5、7 d后，E-cadherin逐渐减低，N-cadherin和Vimentin逐渐升高。TGF-β1刺激HOC 5 d后miR-21的表达增强了4.32倍。分别用增强和抑制慢病毒转染HOC后，miR-21的表达增强了3.82倍和抑制了0.22倍。下调miR-21表达后，TGF-β1致HOC的EMT作用减弱。miR-21过表达后，HOC发生了EMT。结论抑制miR-21的表达可以减少TGF-β1引起的HOC的EMT作用，从而减轻肝纤维化。
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