作者:缪辉来; 张晟晃; 陈念平; 陈明; 郑淑华肝细胞免疫磁性分离法鉴定分化
摘要:目的探讨胚胎造血干细胞抗原阳性(Sca-1^+)细胞亚群在合适的体外诱导体系下向肝细胞或肝细胞前体分化的可行性。方法免疫磁性分离法分离Sca-1^+细胞,相差显微镜观察细胞形态,RT-PCR法检测细胞白蛋白(ALB)、转甲状腺蛋白mRNA水平表达,免疫组织化学法检测AFP和CK8/18蛋白水平的表达,以及检测细胞糖原染色和尿素合成功能。结果免疫磁性分离法分离Sca-1^+细胞能达到(85.57±1.66)%的纯度(P〈0.01),对分离前后细胞活力的影响小(P〈0.05)。随着诱导分化时间延长,细胞形态明显向肝细胞变化,AFP表达消失、CK8/18蛋白表达升高,ALB、转甲状腺蛋白mRNA表达升高,且细胞糖原染色和尿素合成功能增强,逐渐向成熟肝细胞转化。结论免疫磁性分离法能够分离出较高纯度的胚胎造血干Sca-1^+细胞,并能够向肝脏细胞分化。
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