作者：魏王慧; 储艳秋; 陈鹰; 高艳秋; 丁传凡质谱法高密度脂蛋白的结合蛋白定点糖基化新糖型多反应监测
摘要：采用质谱法对4种高密度脂蛋白(HDL)的结合蛋白重组人载脂蛋白血清淀粉样蛋白A(SAA)、α1-抗胰蛋白酶(A1AT)、α2-人体血清糖蛋白(A2HSG)和A载脂蛋白C3(Apo C3)从蛋白质含量(蛋白的绝对定量)、位点特异性糖基化(糖肽的相对定量)及聚糖位点占有率等方面进行了研究.利用四极杆-飞行时间质谱仪(Q-TOF)测量糖蛋白标样酶解产物的二级质谱碎片离子,用Byonic软件发现了新的糖基化位点信息,即增加了原位点处聚糖糖型的种类.对于A2HSG,新增了N-糖基化156位点上的4种糖型, N -糖基化176位点上的6种糖型, O-糖基化319位点的4种O-聚糖和 O-糖基化346位点上的1种糖型.对于Apo C3,只有O-糖基化 94一个位点,在此位点上新增了9种糖型.同时,调整了用于定量蛋白的多肽,使得定量更加准确.采用三重四极杆串级质谱仪(UPLC-ESI-QQQ)研究了4种结合蛋白中多肽和糖肽的多反应监测(MRM)行为,并重新计算了每种聚糖的位点占有率,优化了现有的定量方法.
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