作者：王步高; 曾德年; 覃宗华; 余劲术; 吴彩艳...鸡基因克隆表达
摘要：根据GenBank中收录的鸡B淋巴细胞激活因子（chicken B cell activator factor，ChBAFF）基因序列，设计特异引物，以3周龄鸡法氏囊总RNA为模板，经RT—PCR扩增出ChBAFF的ORF序列，测序后，插入质粒pMhL-c2X，构建重组表达载体，转染到大肠杆菌Rosset（DE3），并以IPTG诱导表达，SDS—PAGE分析表明，重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的25％，融合蛋白的分子量约为75ku，所表达重组蛋白主要存在于菌体裂解物上清液中，为可溶性表达。以淀粉树脂柱亲和层析纯化重组蛋白后进行SDS-PAGE，用BandScan软件分析，提纯重组蛋白的含量可达97．5％。MTT比色法分析证明，纯化的重组蛋白可显著刺激鸡脾脏淋巴细胞的活化。
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