作者：张道伟 曾燕玲 魏福伦 周德贵二斑叶螨cdna文库滴度重组效率
摘要：为研究二斑叶螨发育相关基因的功能，利用TRIzol试剂提取二斑叶螨总RNA，通过SMART技术构建cDNA文库。利用SMARTIVTMOligonucleotide和CDSⅢ／3’PCRPrimer为引物，在反转录酶作用下，合成cDNA第1链，利用LD—PCR方法合成cDNA第2链。合成的双链cDNA经酶切回收后，再连接pDNR—LIB载体，转化大肠杆菌感受态细胞Trans5α，检验库容量和重组效率，并采用PCR方法检测插入cDN段的大小。结果表明，构建的二斑叶螨cDNA文库的库容量为3．54×10^6CFU／mL，重组效率达95．8％，插入片段长度在0．3-2．0kb之间。构建的二斑叶螨cDNA文库质量良好，能够为进一步研究二斑叶螨基因的功能奠定基础。
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