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GST融合的人血浆蛋白S成熟肽的原核表达

作者:卢爱薇; 兰风华; 程烽; 郑德柱; 谢飞; 朱...gst蛋白s人血浆成熟肽诱导融合表达载体ps亲和层析柱原核表达

摘要:目的:构建人蛋白S(protein S,PS)的原核表达载体并诱导其表达。方法:自行设计引物,通过PCR技术,以人PS真核表达载体为模板扩增PS成熟肽编码序列,PCR产物经EcoR1/BamHI双酶切后,将其克隆至GST融合表达载体pGEX—2T中,在E.coli BL21中诱导GST—PS融合蛋白的表达。结果:聚丙烯酰胺凝胶电泳(10%SDS—PAEG)显示。在IPTG的诱导下,BL21重组菌高效表达出一个分子量约为96kD产物,与预期大小相符,该产物可通过GST亲和层析柱纯化。对重组质粒的序列分析表明,插入片段的序列与Genebank登录的人PS基因编码序列完全一致。结论:人PS编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-2T,并在E.coli BL21中获得表达,为进一步研究奠定了基础。

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福州总医院学报

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