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巴西橡胶树过氧化氢酶基因HbCAT2的克隆及表达分析

作者:李言; 余文才; 陈月异; 田维敏过氧化氢酶树皮低温胁迫

摘要:为了探索过氧化氢酶(catalase, CAT)在巴西橡胶树响应低温胁迫应答中的作用。通过RT-PCR技术从橡胶树中分离鉴定了HbCAT2,其c DNA全长1 780 bp,包括1 479 bp开放阅读框,编码492个氨基酸,其分子量为57.18 k D,理论等电点为6.73。该酶的氨基酸序列含有血红素基团必须的5个特定位置氨基酸残基(组氨酸(H) 65,丝氨酸(S) 104,天冬酰胺(N) 138,精氨酸(R) 344和酪氨酸(Y) 348),以及钙调素结合结构域和过氧化物酶体靶信号。荧光定量PCR分析表明,HbCAT2在成熟叶片中的表达显著高于幼嫩叶片。在不同的环境胁迫下表达模式不同,特别在低温(4℃)胁迫下,HbCAT2基因在抗寒性强的橡胶树无性系‘93-114’和抗寒性弱的橡胶树无性系‘热垦501’中都呈现显著上调的表达模式,而且在‘93-114’中的表达量显著高于‘热垦501’。另外,HbCAT2在橡胶树无性系‘热研8-79’寒害较轻原生皮中的表达量较高,在寒害较重再生皮中的表达量较低,而且在抗寒性较强‘PR107’中的表达量显著高于抗寒性较弱‘热研8-79’。推测HbCAT2基因可能参与橡胶树低温胁迫应答。

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