作者：钟杰; 佟硕秋; 贡献; 林宗梅; 孙元烽; 张...烟草caf1原核表达生物信息学分析
摘要：CAF1基因在植物的发育和抗逆性方面起到特定的作用。本研究旨在通过对烟草中CAF1基因进行克隆与原核表达分析,为研究其代谢机制提供数据支持。我们从野生烟草中提取总RNA,通过RT-PCR克隆获得CAF1的cDNA序列,NCBI登录号为KJ003855,生物信息学分析表明,CAF1 ORF长为855 bp,编码285个氨基酸,亚细胞定位于细胞核,其编码的CAF1蛋白仅有1个高度保守结构域:CAF1 superfamily(16~284);构建p ET30a-CAF1原核表达载体,转化到E.coli BL21(DE3)中,获得浓度为0.213 mg/mL、纯度90%,且与预期一致的28 kD蛋白质。目的蛋白的成功表达为进一步研究CAF1在抗病、抗虫功能提供理论参考和数据支持。
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