作者：邹璐; 何钢; 刘贤桂; 张虹; 席飞飞; 叶生...orchiodes愈伤组织诱导悬浮培养
摘要：为初步建立仙茅(Curculigo orchiodes Gaertn)细胞悬浮培养体系。以仙茅幼叶为外植体,诱导产生愈伤组织后进行仙茅细胞悬浮培养研究。以MS为基本培养基,研究了植物生长调节剂对仙茅愈伤组织诱导和继代的影响,以及接种量,2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D),蔗糖,水解酪蛋白,2-氮吗啉乙烷磺酸(MES),L-脯氨酸(L-Pro)对仙茅细胞悬浮培养的影响。结果表明:仙茅愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,所得的愈伤组织颜色淡黄,质地疏松,诱导率达100%;最佳继代培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,平均增殖倍数达10.8。仙茅细胞悬浮培养最佳培养基和培养条件为MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/L,接种量75 g/L,水解酪蛋白300 mg/L,MES 2 g/L,L-Pro 700 mg/L,摇床转速120 r/min,25℃光照培养,光照时间12 h/d,光照强度1 200 lx。该条件下悬浮细胞生长良好,最大生长量为(9.68±0.2)×10^5个/mL。初步选择出仙茅愈伤组织细胞的悬浮培养条件,也为仙茅细胞扩大培养及有效成分的提取提供物质基础。
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