作者：史梦玉; 林春花; 刘文波; 缪卫国; 郑服丛橡胶树白粉菌甘油破壁法dnalamp检测
摘要：为了探索建立一种快速、简便适用于田间LAMP （loop-mediated isothermal amplification）检测的橡胶树白粉菌DNA粗提取方法，在无液氮也不需要研磨的情况下，利用渗透压破壁的方法提取橡胶树白粉菌DNA。通过改变渗透压对橡胶树白粉菌DNA进行提取，使用特异性引物OH-666A （5＇-ACTGACACCCCATCACGACTAAAA-3＇）, OH-666S （5＇-CATATTCTCACGAAGGAAAGCATTG-3＇）进行PCR扩增，并与试剂盒提取DNA的PCR产物进行比较，对提取的DNA进行LAMP检测。20μL甘油加入600μL ddH20，离心10min，去上清，加50μL水离心2min即可提出橡胶树白粉菌的DNA，PCR扩增能获得清晰目的条带，对得到的扩增产物进行测序，同时对提取的DNA进行LAMP检测，并与实验室常规方法比对，所有结果均一致。破壁法可用于橡胶树白粉菌DNA的快速提取，由于不需要特殊仪器，且快速方便，在田间容易实现，所以更适用于田间橡胶树白粉菌DNA的田间粗提取，对开展橡胶树白粉病田间分子预测提供了技术支持。
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