作者:严武平; 李娟玲; 吴淑敏; 覃少昌; 杨祥飞...鹧鸪茶影响因子反应体系优化
摘要:为了更好地应用SRAP分子标记技术于鹧鸪茶遗传多样性研究中,本研究采用单因子试验和正交试验相结合的方法对鹧鸪茶SRAP-PCR反应体系中的主要影响因子进行优化,先利用单因素试验找到各因子的适宜浓度范围,再采用L160(4^4)正交表进行正交试验,按照遗传多样性分析的要求,直观分析16个试验组合间的扩增效果,从中构建出了一套重复性好、条带清晰且稳定的SRAP-PCR体系:在20μL体系中,10×PCR Buffer 2μL,Taq DNA聚合酶3 U,d NTPs 0.15 mmol/L,引物浓度0.4μmo l/L和模板DNA 40 ng。经检验,该优化体系可适用于鹧鸪茶种质资源SRAP分析的PCR反应条件和反应程序,也可应用于鹧鸪茶不同居群间的亲缘关系和遗传多样性分析。
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