作者:麻鹏达; 周晓馥; 秦波; 董春光; 王兴智rubisco小亚基基因基因片段亚克隆瞬时表达载体基因构建植物叶绿体
摘要:1,5一二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶位于植物叶绿体中,是绿色植物中含量最丰富的蛋白,它催化CO2固定和光呼吸作用的第一步.从含Rubisco小亚基基因片段的pGR107-rbcS质粒中亚克隆出Rubisco小亚基基因片段,将PCR产物与pGEM-T Easy载体连接,用EcoRI酶切鉴定酶切重组载体,利用低溶点胶回收大约300bp大小的Rubisco小亚基基因片段,将其回收片段与pSLJ75515瞬时表达载体连接,用EcoRI酶切鉴定,筛选出阳性重组体,即为pSLJ75515-rbcS瞬时表达载体.本实验为进一步研究Rubisco小亚基基因功能和基因沉默机制奠定了基础.
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