作者：黄珍玉; 杨芃原蛋白质组学溶液酶解胶内酶解质谱蛋白质溶液蛋白酶解电泳分离凝胶中国仓鼠卵巢细胞pvdf膜
摘要：报道了改进的凝胶电泳分离后蛋白质溶液酶解方法.将凝胶分离后的蛋白转移到PVDF膜上,直接用碳酸氢铵中和从膜上的蛋白洗脱溶液至弱碱性,并在此溶液中直接进行蛋白酶解.方法避免了胶内杂质对质谱鉴定蛋白质的干扰.用标准蛋白进行了验证,并在此基础上鉴定了中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞系中的16个蛋白点.与已报道的方法比较,本方法蛋白回收率提高到90%左右;与传统的胶内酶解方法比较,本方法具操作简单,实验流程较短;涉及的试剂较胶内酶解少,因此带来的杂质影响小;在蛋白转印以后还可与许多其它实验方法相结合,比如免疫印迹等优点.
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