作者：张普敦; 任吉存检测系统单分子相关光谱单光子计数器高数值孔径greendna片段生物大分子高稳定性高灵敏度荧光信号实时记录优化系统结构参数单个分子物镜激光束光敏区信噪比蛋白质小分子高度针孔构型焦点直径
摘要：基于激光共焦构型,构建了一套高灵敏度和高稳定性的荧光相关光谱单分子检测系统.采用高数值孔径物镜使激光束高度聚焦,并用同一物镜收集样品的荧光,单光子计数器用于实时记录荧光信号.优化系统保持物镜焦点、针孔以及单光子计数器光敏区高度同轴.采用60×1.2(NA)的水浸物镜及直径为160 μm的针孔得到的检测系统结构参数为ω0和z0分别为0.42 μm和1.33 μm,照射微区的体积为1.3 fL.单个Rhodamine Green分子可获得13倍的信噪比.用该系统获得了小分子和生物大分子(DN段和蛋白质)的高质量荧光相关图谱,成功实现了单个分子的检测.
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