作者:刘保生; 高静; 杨更亮荧光共振能量转移罗丹明6g蛋白质吖啶橙荧光猝灭法十二烷基苯磺酸钠牛血清白蛋白人血清白蛋白相对标准偏差总蛋白含量最佳条件缓冲溶液荧光增强间接测定线性范围工作曲线双缩脲法检出限回收率稳定性
摘要:研究了吖啶橙(AO)与罗丹明6G(R6G)之间能量转移的最佳条件.在pH=7.20的Tirs-HCl缓冲溶液,十二烷基苯磺酸钠介质中,AO-R6G能够发生有效能量转移,使R6G荧光增强.蛋白质的加入使R6G荧光猝灭,以此建立了利用AO-R6G荧光共振能量转移间接测定蛋白质的新方法.牛血清白蛋白、人血清白蛋白工作曲线线性范围分别为1.0~31和1.0~30 mg/L; 检出限分别为0.32和0.33 mg/L;平行6次测定相对标准偏差为1.1%~2.0%;回收率为96.7%~103.2 %.此方法的稳定性好,选择性高,用于人血清试样中总蛋白含量的测定,与常用的双缩脲法基本一致.
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