电离辐射诱导淋巴细胞线粒体DNA889bp和3895bp缺失的分析

作者：封江彬; 陆雪; 陈德清; 刘青杰电离辐射淋巴细胞永生化细胞系线粒体dna缺失

摘要：探索电离辐射是否诱导人淋巴细胞永生化细胞系mtDNA889bp和3895bp缺失。对指数生长期的人淋巴细胞永生化细胞系照射10Gy^60Coγ射线，照射后24h、48h提取纯线粒体DNA，用巢式巢式聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）方法进行线粒体DNA889bp、3895bp缺失分析，与未照射细胞系进行比较；并将纯化的第二轮PCR产物进行测序和核苷酸同源性分析。结果表明，用于分析线粒体DNA3895bp缺失的引物，可特异性扩增出10Gy照射诱导的淋巴细胞线粒体DNA3895bp缺失，该扩增产物经纯化、测序证实线粒体缺失发生在线粒体DNA序列的548-4443bp之间。研究发现，用于扩增线粒体DNA889bp的引物在扩增出目的DN段的同时，也可扩增出未发生缺失的DN段。第二轮缺失片段扩增产物经纯化、测序证实线粒体缺失发生在线粒体DNA序列的11688—12576bp之间。所有未照射细胞无线粒体DNA889bp和3895bp的缺失。说明电离辐射可诱导淋巴细胞线粒体DNA889bp和3895bp的缺失。

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