作者：许扬梅; 龚福生; 刘沁颖; 刘施佳; 黄丽洁...微小rna慢病毒载体肝癌干细胞
摘要：目的研究MicroRNA-194(miR-194)过表达和抑制表达对细胞株Hep-3b中侧群细胞增殖功能影响。方法构建miR-194过表达和抑制表达慢病毒并感染Hep-3b细胞。流式细胞仪鉴定各感染组SP侧群比例,QPCR检测各组细胞miR-194-5p表达,CCK-8法检测各组细胞增殖能力,软琼脂克隆形成实验检测细胞克隆形成能力。结果流式细胞仪鉴定发现miR-194过表达Hep-3b组SP细胞含量与miR-194抑制表达Hep-3b组差异具有统计学意义(LSD-t=3.550,P=0.012)。QPCR检测显示miR-194过表达Hep-3b组miR-194-5p水平高于miR-194抑制表达Hep-3b组(LSD-t=4.680,P=0.007)。CCK-8实验表明miR-194过表达Hep-3b组和miR-194抑制表达Hep-3b组细胞增殖能力差异有统计学意义(LSD-t=5.621,P=0.002)。软琼脂克隆形成实验显示miR-194过表达Hep-3b组比miR-194抑制表达Hep-3b组形成细胞克隆少(LSD-t=5.849,P=0.001)。结论成功构建了miR-194过表达和抑制细胞株,miR-194抑制组显示明显的干细胞特征,其含有更多SP细胞,具有更强的细胞增殖能力和自我更新能力。
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