作者：陈冬冬; 林佳生; 严伟; 张韬电化学传感器多重信号放大策略骨肉瘤
摘要：目的通过"多重信号放大策略"构建一种miR-135b电化学传感器,并将其用于骨肉瘤标志物miR-135b的检测,考察其应用价值。方法设计高特异性茎环捕获探针(CP)并进行末端氨基修饰,再采用L-赖氨酸通过循环伏安电聚合法在电极表面形成一层纳米膜,将捕获探针与修饰电极通过共价键相连后,通过T-7核算外切酶实现靶序列(TP)循环,再通过辅助探针AP1和AP2,使得捕获探针、辅助探针AP1和AP2三者通过DNA纳米长距自组装技术进行级联杂交,从而在电极表面形成"三明治"DNA双链形态的miR-135b电化学传感器,并用其检测骨肉瘤、良性骨肿瘤及健康对照组人群血清中的miR-135b。结果成功构建了一种基于"多重信号放大策略"的miR-135b电化学传感器,其检测峰电流值与miR-135b浓度的对数在1.0~1.0×10~4 pmol/L范围内成正比,检出限(S/N=3)为0.52 pmol/L,具备良好的稳定性、重现性和特异性,在检测人血清时具有良好的灵敏性。结论成功构建了一种基于"多重信号放大策略"的miR-135b电化学传感器,其检测限低,准确性好,作为骨肉瘤患者的大规模筛查和连续动态检测具有重大的现实意义。
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