作者：陈德波; 洪成业; 王青兰; 洪志鹏; 施凉潘...结直肠肿瘤蛋白质组学脯氨酸羟基化质谱分析法
摘要：目的 分析结直肠癌（CRC）组织和正常癌旁组织之间的差异表达蛋白质,探讨其与CRC疾病特征的关系。方法 应用二维聚丙烯酰胺凝胶电泳法（2D-PAGE）分析12例配对CRC组织和正常癌旁组织之间的差异表达蛋白,并运用激光解吸电离飞行时间质谱分析（MALDI-TOF-MS）和MS/MS法对差异表达的蛋白质标记点进行鉴定和分析。找出CRC组织中表达上调的蛋白脯氨酰-4-羟化酶（P4HB）β亚单位作为兴趣蛋白后,通过Western-blot验证,并运用免疫组织化学技术检测P4HB在CRC中的表达情况,分析其与CRC的临床病理特征及预后的关系。结果 2D-PAGE分析和MALDI-TOF-MS鉴定结果显示,CRC组织中P4HB表达丰度比正常黏膜组织上调2.01倍（P〈0.01）。Western-blot结果显示,CRC组织中P4HB的表达水平明显高于其配对的正常黏膜组织[（1.36±0.54）vs（0.74±0.35）]（P〈0.05）。P4HB蛋白在CRC组织、腺瘤组织和正常黏膜组织中的表达阳性率依次减低,分别为43.85%（82/187）,19.35%（12/62）及12.67%（19/150）,三者间的差别均有统计学意义（P〈0.001）。P4HB蛋白表达与CRC的TNM分期（P=0.003）、肿瘤分化程度（P=0.020）、肿瘤大小（P〈0.001）有关,而与患者的性别（P=0.880）、年龄（P=0.464）及肿瘤部位（P=0.293）无关。Log-rank检验结果显示,在CRC患者中,P4HB表达阳性组与阴性组的生存时间差别无统计学意义（P=0.110）。结论 CRC组织中P4HB表达上调,这与CRC更晚的分期、低分化及较大的肿瘤相关。
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