作者：匡云波; 侯令; 方晓勤; 王佳璐; 杨燕君; ...太子参
摘要：为探求快速、灵敏的太子参脱毒检测技术,建立太子参蚕豆萎蔫病毒2（Broad bean wilt virus 2,BBWV2）和芜菁花叶病毒（Turnip mosaic virus,TuMV）的巢式RT-PCR快速检测方法,根据GenBank数据库中这2种病毒外壳蛋白（coat protein,cp）基因核苷酸序列的保守区域分别设计2对简并引物,建立和优化巢式RT-PCR扩增体系,继而进行常规RT-PCR和巢式RT-PCR灵敏度的比较,并应用巢式RT-PCR对7份田间栽培太子参病样和4份脱毒苗样品进行检测。结果显示：BBWV2、TuMV的巢式引物最佳退火温度分别为60、62℃;采用巢式RT-PCR,这两种病毒样品cDNA原液在稀释10~5倍后仍能扩增出特异性条带,比常规RT-PCR的灵敏度至少高10倍。本研究建立的巢式RT-PCR检测方法可快速、稳定、准确地检测BBWV2和TuMV,且具有更高的灵敏度,更能满足太子参脱毒检测的需要。
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