茉莉花原生质体瞬时表达体系的建立及应用

作者：张娅; 刘晓烽; 张婧; 何弦; 袁媛; 吕美玲...茉莉花原生质体亚细胞定位

摘要：探索了茉莉花原生质体瞬时转化的方法,发现室外种植盛开的茉莉花花瓣更适于分离有活力的原生质体,在15 g·L^-1纤维素酶、8 g·L^-1果胶酶和4 g·L^-1离析酶共同作用下,于25℃黑暗条件酶解5 h,所获得的原生质体产量和活性最佳.当细胞浓度为4×10^5个·mL^-1,外源质粒DNA含量为75μg·mL^-1原生质体时,在200 g·L^-1的PEG-4000介导转化2~10 min,可获得较高的转化效率.利用本研究建立的茉莉花原生质体瞬时转化体系成功鉴定了3个茉莉花来源蛋白的亚细胞定位,为高通量开展茉莉花关键基因的功能研究提供了技术支持.

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