TeiR融合蛋白分离及多克隆抗体的制备

作者：陈建秋 艾育芳 潘大仁 周以飞 潘菲 林彬...睾丸酮丛毛单胞菌teir多克隆抗体

摘要：提取睾丸酮丛毛单胞菌（Comamonastes tosteroni）基因组DNA，PCR扩增teiR基因，将扩增产物克隆到pET28a中，经酶切验证后获得teiR基因表达载体pET28a—teiR．将重组质粒转化大肠杆菌（Escherichia coli）BL21，添加终浓度为1mmol·L-1的IPTG进行诱导，提取细菌总蛋白进行蛋白的SDS—PAGE电泳．并根据融合蛋白特性，利用Ni—NTASpin Column对TeiR融合蛋白进行分离纯化，经分离纯化后的重组蛋白在SDS-PAGE上呈现出单一条带．进一步以获得的TeiR融合蛋白为抗原，制备兔抗TeiR多克隆抗体，经ELISA测定该抗体的效价为1：10000，该抗体与睾丸酮丛毛单胞菌天然TeiR蛋白反应良好，说明该抗体特异性良好．

注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社