小麦成熟胚再生体系及基因枪转化的初步研究

作者：林德书; 王艳丽; 庄振宏; 鲁国东; 叶兴国...再生体系成熟胚基因枪转化愈伤组织再生培养基gus基因琼脂糖小麦品种基因导入葡萄糖外植体接种体成熟再生苗再生率介导法2g诱导成苗肉眼

摘要：以小麦品种晋麦2148的成熟胚为外植体,消毒后用解剖刀刨碎,接种于MS+VB5+11. 2 g·L-1葡萄糖+2 mg·L-1 2,4-D+8 g·L-1琼脂糖的培养基中诱导愈伤组织,将诱导3周的成熟胚愈伤组织接种到胚状体成熟培养基(MS+VB5+11.2g·L-1葡萄糖+0.2mg·L-1 IAA+8 g·L-1琼脂糖)中培养4-8周,然后转接到再生培养基(1/2MS+VB5+30 g·L-1蔗糖+8 g·L-1琼脂糖)中进行再生成苗.接种1200块成熟胚,得到1123块愈伤组织,最终形成258株再生苗,再生率为21. 5%.在建立了再生体系的基础上,用基因枪介导法将GUS基因导入成熟胚愈伤组织,X-gluc染色表明,GUS基因已经在小麦成熟胚愈伤组织中表达.将100块愈伤组织用X-gluc染色,29块愈伤组织出现肉眼可见的蓝色小点.

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