作者：王相生; 孙亚宁; 阮崇美; 张全伟; 张勇; ...玉米赤霉烯酮枯草芽孢杆菌母猪
摘要：本试验旨在建立玉米赤霉烯酮（ZEN）降解酶基因ZEN-jjm在枯草芽孢杆菌中的表达体系,确定其产物的生物降解活性及对母猪繁殖性能的作用。克隆ZEN-jjm基因,经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切后连接至p HT01表达载体中,构建重组质粒;转化枯草芽孢杆菌,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析ZEN-jjm蛋白表达水平。高效液相色谱法（HPLC）检测表达的ZEN-jjm蛋白降解ZEN的活性。通过对母猪的繁殖性能的评价,确定ZEN降解酶降解ZEN对母猪繁殖性能的影响。双酶切和测序结果表明：ZEN-jjm成功插入p HT01中,SDSPAGE表明获得1株高效表达目的蛋白的重组枯草芽孢杆菌,其大小约为29 ku。HPLC结果表明表达的ZEN-jjm蛋白能有效地降解ZEN;表达的ZEN-jjm蛋白能显著缓解ZEN对繁殖母猪的毒害作用（P〈0.05）。综上：1）本研究成功构建了表达ZEN-jjm在枯草芽孢杆菌中的表达载体,并在枯草芽孢杆菌中得到了表达。2）表达的ZEN-jjm蛋白具有降解ZEN的生物活性。3）在饲粮中添加ZEN-jjm蛋白能显著降低ZEN对母猪能繁殖性能的危害。
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