作者：王雄; 李孟伟; 马杰; 陈清华牛膝多糖对脂多糖促炎细胞因子toll样受体4
摘要：本试验旨在考察牛膝多糖（ABPS）对脂多糖（LPS）免疫应激下仔猪空肠上皮细胞（IPEC-J2）促炎细胞因子分泌和表达的影响,并探讨ABPS调控IPEC-J2免疫应激可能的作用机制。选用4~5代的IPEC-J2,培养基中分别添加0（对照）、300、600、900、1 200μg/m L ABPS和10μg/m L LPS,每组12个重复,每孔为1个重复。培养72 h后,采用酶联免疫吸附测定（ELISA）方法检测ABPS对促炎细胞因子白细胞介素1（IL-1）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素8（IL-8）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）分泌量的影响,采用实时定量PCR测定Toll样受体4（TLR4）、核转录因子κB（NF-κB）的mRNA表达量,采用Western blot法测定TLR4、NF-κB、磷酸化核转录因子κB（p-NF-κB）蛋白表达量。结果显示：与对照组相比,300、600、900和1 200μg/m L ABPS组能显著减少IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的分泌量（P〈0.05）;300μg/m L ABPS组能显著减少p-NF-κB蛋白的表达量（P〈0.05）,900和1 200μg/m L ABPS组能显著减少TLR4、NF-κB的mRNA和NF-κB蛋白的表达量（P〈0.05）。由此可见,ABPS通过TLR4/NF-κB信号转导途径来调控促炎细胞因子的分泌,从而缓解免疫应激,低浓度ABPS通过直接抑制NF-κB磷酸化过程来降低免疫应激,高浓度ABPS则是通过抑制TLR4 mRNA、NF-κB mRNA和NF-κB蛋白的表达量来缓解免疫应激。
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