作者:刘金凤; 杜毅超; 覃绍敏; 白安斌; 张振江...猪细小病毒重组杆状病毒tat蛋白转导域病毒样粒子
摘要:为表达和鉴定含TAT蛋白转导域的重组猪细小病毒(PPV)样粒子,以PPVN株为模板扩增其VP2基因,将具有穿膜功能的TAT蛋白转导域连接在VP2基因的N端,构建TAT-VP2融合基因,并用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统构建含TAT-VP2基因的重组杆状病毒,感染昆虫细胞进行融合基因的表达,通过间接免疫荧光(IFA)、电镜观察及血凝试验对表达产物进行鉴定。IFA结果显示细胞表达产物能与鼠抗PPV抗体发生特异性反应,透射电镜观察到表达产物可装配形成典型的病毒样粒子结构,形态大小与野生型PPV及VP2病毒粒子相似;血凝试验证实融合TAT重组PPV-VLPs具有与全病毒相同的血凝活性。试验结果为进一步研制高效PPV亚单位疫苗奠定了基础。
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