作者：吴仁蔚; 毕丁仁禽流感病毒m2蛋白原核表达
摘要：基质蛋白M2是流感病毒的3种表面抗原之一，也是流感病毒中最为保守的蛋白之一，被认为是具有交叉保护能力的流感疫苗的理想候选抗原。论文从H9N2亚型禽流感病毒感染的狗肾传代（madin darby canine kidney，MDCK）细胞中克隆全长M2基因，并采用OE—PCR（overlap extension，PCR）得到缺失跨膜区的M2基因（sM2）。将sM2基因克隆到pGEX-KG原核表达载体，在大肠埃希菌中获得表达量较高的融合蛋白GST—sM2，而且以可溶形式存在。利用亲和层析的方法纯化蛋白，经Western blot证明，GST—sM2蛋白具有良好的免疫原性。ELISA检测发现GST—sM2能与H9、H5和H7亚型禽流感病毒抗体均发生反应。进一步将纯化蛋白与佐剂混合后免疫Balb／c鼠，结果在免疫小鼠体内产生了较高滴度的特异性抗体，为开发具有交叉保护力的禽流感疫苗奠定了基础。
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