作者:丛晓燕; 李俊; 吴家强; 张祯涛; 赵鸿雁; ...猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲型欧洲型n蛋白抗原多肽原核表达纯化
摘要:对原核中以包涵体形式高效表达的美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段进行了变性、复性与纯化研究。将美洲型PRRSV重组质粒pGEX-6P-1-N转化入E.coli BL21(DE3)细胞中,成功表迭了重组蛋白GST—N,超声裂解复性后目的蛋白经GSTrapFF纯化试剂盒纯化后,纯度可达90%以上。将欧洲型PRRSV重组质粒PQE30-N转化入E.coli M15细胞中表达了重组蛋白His—N。超声裂解后目的蛋白经HisTrapHP蛋白纯化试剂盒纯化后,纯度可达95%以上。Western blot结果表明,两种蛋白分别被美洲型和欧洲型PRRSV阳性血清识别。纯化出的大量美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段,为PRRSV的鉴别诊断提供了抗原基础。
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