作者:谢霜; 杨敏; 杜永洪; 李岱容低频低强度超声巨噬细胞耻垢分枝杆菌凋亡活性氧
摘要:目的探讨低频低强度超声(low frequency low intensity ultrasound,LFLIU)对巨噬细胞内耻垢分枝杆菌的损伤效应及机制。方法将巨噬细胞RAW264.7分为超声辐照0、5、10 min和15 min组(n=3),应用MTT比色法分析不同超声强度对RAW264.7细胞存活率的影响,采用流式细胞术检测RAW264.7细胞经超声辐照以及吞噬细菌后的凋亡率和坏死率,使用平板计数法评估RAW264.7细胞内耻垢分枝杆菌活性,使用激光共聚焦显微镜观察RAW264.7细胞经超声辐照后活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生。结果超声辐照声强为0.14 W/cm^2,辐照时间为5、10 min时,RAW264.7细胞活性未见明显影响,存活率分别为(116.37±9.54)%、(97.14±9.26)%;经0.14 W/cm^2超声辐照5 min后,RAW264.7细胞的凋亡率和坏死率显著大于超声辐照0 min组(P〈0.05);平板菌落计数结果显示,RAW264.7细胞内耻垢分枝杆菌经声强0.14 W/cm^2超声辐照5、10 min后活性均低于超声辐照0 min组(P〈0.05);激光共聚焦观察到0.14 W/cm^2超声刺激RAW264.7细胞产生了ROS。结论 LFLIU能诱导RAW264.7细胞凋亡和产生ROS,并导致RAW264.7细胞内耻垢分枝杆菌活性下降。
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