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橄榄苦苷对破骨细胞的分化以及骨吸收功能的影响

作者:陈侯磬; ; 刘扬; 田冬冬; 袁威; 张然熙; ...橄榄苦苷破骨细胞分化骨吸收

摘要:目的探讨橄榄苦苷(oleuropein)对破骨细胞分化成熟以及骨吸收功能的影响及其可能机制。方法把不同浓度的橄榄苦苷(12.5、25、50μmol/L)分别加入由核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)诱导的体外破骨细胞培养体系中,用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resist ant acid phosphatase,TRAP)染色方法观察呈TRAP阳性的多核细胞;RAW264.7细胞也用RANKL诱导,用流式细胞仪分析橄榄苦苷对破骨细胞凋亡的影响;在扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)下观察骨吸收陷窝,并用图像分析软件统计其面积。采用Western blot法检测橄榄苦苷对破骨细胞特异性蛋白组织蛋白酶K(cathepsin K,CTSK)、激活T细胞核因子1(nuclear factor of activated T-cells 1,NFATC1)及相关信号通路蛋白表达的影响。结果 TRAP染色结果显示,橄榄苦苷能显著抑制RANKL诱导的破骨细胞的形成,且呈浓度依赖性(P〈0.05);橄榄苦苷能下调破骨细胞特异性蛋白CTSK的蛋白表达水平(P〈0.05);橄榄苦苷对破骨细胞的凋亡无明显影响(P〉0.05);橄榄苦苷能显著减少骨吸收陷窝的面积(P〈0.05);橄榄苦苷能够下调NFATC1及磷酸化p38(p-p38)的表达(P〈0.05)。结论橄榄苦苷可以抑制由RANKL诱导的破骨细胞分化以及破骨细胞的骨吸收功能,可能和橄榄苦苷能够下调p38/MAPK信号通路有关。

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