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Tmub1沉默对大鼠肝部分切除术后肝细胞增殖的影响

作者:马德宾 沈雁兵 王保林 陈平tmub1肝再生securin慢病毒体内转染

摘要:目的探讨Tmubl蛋白在肝再生过程中的作用及其在肝再生过程中对Securin蛋白的影响。方法54只大鼠随机分为3组即TmublRNAi慢病毒组、空载慢病毒组及正常对照组,其中TmublRNAi慢病毒组、空载慢病毒组注射相应病毒颗粒(3×10’TU),对照组未行注射,2d后行肝部分切除术(partialhepatectomy,PH),每组分为6个亚组:PH术后0、2、6、12、24、48h,每亚组3只大鼠,术后提取原代肝细胞、留取肝脏组织标本,利用Real—timePCR和Westernblot检测慢病毒干扰效果及Tmubl沉默后对Securin蛋白的影响。M1Tr实验、流式细胞仪检测原代肝细胞的增殖情况。结果Real.timePCR和Westernblot表明实验组TmublmRNA和蛋白被有效抑制;Tmubl沉默后securinmRNA表达无明显变化,而G2/M期securin蛋白量明显减少。MTT实验表明Tmubl沉默可明显上调PH术后6~24h肝细胞的增殖速率;流式细胞分析结果显示实验组处于G2/M期的肝细胞比例明显增高。结论Tmubl蛋白在肝再生过程中对肝细胞增殖进程发挥负向调控作用,而该作用可能与其在蛋白质水平影响了Securin的表达密切相关。

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第三军医大学学报

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