作者:蒋知新 李庆勇 张清华 沙杭 李安全 林虎 ...生物人工肝零下非结冰细胞凋亡
摘要:目的比较零下非结冰(-0.8℃)与常规低温(4℃)分别用于人工肝用永生化L-02细胞保存的效果,探索零下非结冰保存肝细胞与细胞凋亡的关系。方法制备好的UW液保存的L-02细胞悬液分为以下2组:-0.8℃组(零下非结冰组),4℃组(对照组)。低温保存24、48h及72h后,分别测定细胞存活率、凋亡率、坏死率(流式细胞术)及ALT释放、尿素合成功能、白蛋白分泌功能。结果 -0.8℃(零下非结冰)较4℃明显提高了长时间低温保存L-02细胞的存活率[72h:(70.17±2.82)%vs(60.05±3.17)%,P〈0.01],降低了细胞凋亡率[72h:(5.73±1.68)%vs(9.20±2.35)%,P=0.02],抑制了ALT释放[72h:(6.21±0.65)U/Lvs(8.68±1.18)U/L,P〈0.01],更好地维持了L-02细胞的尿素合成功能[72h:(1.01±0.14)mmol/Lvs(0.66±0.09)mmol/L,P〈0.01]及白蛋白分泌功能[72h:(9.04±0.53)μg/mlvs(7.70±0.52)μg/ml,P〈0.01]。2组间细胞坏死率差异无统计学意义[72h:(18.45±1.88)%vs(21.82±3.86)%,P〉0.05]。结论零下非结冰可明显维持L-02细胞存活率,降低低温损伤引起的细胞凋亡,有效保护肝细胞尿素合成和白蛋白分泌功能。
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