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钟基因Bmal1对褪黑素抑制TM3细胞睾酮节律性分泌的作用研究

作者:钱琳; 韩静静; 郭依晨; 严锐; 童建; 肖卫...褪黑素昼夜节律睾酮bmal1

摘要:目的研究褪黑素对TM3细胞睾酮分泌节律的影响,探讨钟基因Bmal1在褪黑素抑制TM3细胞睾酮节律性分泌的作用。方法运用地塞米松诱导小鼠睾丸间质细胞(TM3细胞)内源性节律的产生,通过ELISA试剂盒和实时定量RT-q PCR检测TM3细胞睾酮及类固醇急性调节基因St AR水平,研究褪黑素对睾酮节律性分泌的作用。运用siRNA干扰技术,下调钟基因Bmal1的表达,研究Bmal1在褪黑素抑制TM3细胞睾酮节律性分泌过程中的作用。结果10-6mol/褪黑素处理后,TM3细胞的睾酮浓度在ZT0、ZT4、ZT8、ZT12、ZT16、ZT20和ZT24各授时时点(zeitgeber time,ZT,光照开始的时间为ZT0)与对照组相比均显著下降,差异有统计学意义(P〈0.05),St AR水平在ZT0、ZT4、ZT8和ZT12时点较对照组显著降低(P〈0.05)。余玄分析结果显示,地塞米松作用后TM3细胞的睾酮分泌及St AR基因表达具有一定的节律性,峰值时间分别为ZT11:40和ZT8:06。褪黑素处理后,褪黑素组睾酮及St AR的节律均发生变化,表现为中值分别下降36.53%和32.09%,振幅分别减弱18.54%和44.44%。Bmal1干扰后,与对照组相比,褪黑素作用于Bmal1低表达的细胞,睾酮浓度、St AR水平及睾酮分泌节律改变差异均无统计学意义(P〉0.05);对St AR节律性表达的影响减小。结论适当剂量的褪黑素不仅可抑制TM3细胞中睾酮水平及St AR的转录水平,而且能改变两者的节律性表达。钟基因Bmal1在褪黑素抑制TM3细胞睾酮节律性分泌过程中发挥了一定的调控作用。

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