作者：张勤丽; 吉秀亮; 刘承芸; 郑金平; 牛侨铝神经母细胞瘤细胞细胞死亡
摘要：目的研究铝诱导的神经母细胞瘤细胞的死亡方式及途径,探讨其毒理学及在神经细胞退行性变中的意义。方法用铝染毒神经母细胞瘤细胞株制作铝致神经细胞损伤模型,在铝和Nec-1处理后用光学显微镜观察细胞的生长状况,CCK-8法检测细胞的活力变化,流式细胞仪检测细胞的凋亡率、坏死率、线粒体膜电位和活性氧含量,电子显微镜观察细胞的超微结构变化。蛋白质印迹（Western blot）法检测LC3蛋白表达量。结果铝染毒神经母细胞瘤细胞形态学观察结果表明,凋亡与坏死并存于染铝细胞中;流式细胞术定量检测铝染毒后细胞的凋亡率和坏死率均显著升高（P〈0.05,P〈0.01）。超微结构显示有凋亡早期和晚期典型的核凝聚和多量典型双层膜结构的自噬小体。铝染毒SH-SY5Y细胞中加入Nec-1后,可以有效地降低细胞的坏死率（P〈0.05,P〈0.01）,显著降低线粒体的膜电位（P〈0.05,P〈0.01）,有效减少自噬体的形成及发展,且与细胞的自噬过程有关。Western blot结果显示LC3蛋白表达量随Nec-1（0~90μmol/L）作用浓度的提高而显著下降（P〈0.05,P〈0.01）。结论铝诱导的神经母细胞瘤细胞的死亡方式不仅包括传统的凋亡和坏死,自噬和程序性坏死也存在于其中,这可能与铝致神经退行性变的细胞丢失方式有关。
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