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原代肝细胞和传代细胞对微囊藻毒素-LR的敏感性

作者:谷康定; 林群馨原代肝细胞传代细胞细胞毒性

摘要:目的比较微囊藻毒素-LR对原代肝细胞和多种传代细胞株的毒性,探讨建立经济、简便的研究该毒素细胞模型的可能性。方法采用胶原蛋白酶2步灌流法制备大鼠原代肝细胞,以及用不同宿主来源的8种细胞株与不同浓度的微囊藻毒素.LR作用,MTT法测定细胞毒性终点及乳酸脱氢酶试验测定细胞膜受损与否。结果原代肝细胞培养至24h时,毒素浓度在5.0ng/mL即对细胞开始产生毒性并呈剂量-反应关系。48h时,细胞毒性更加剧烈,反应曲线呈典型S形,Ec50为5.2ng/mL。当藻毒素为1.3ng/mL时,24h后,原代肝细胞LDH逸出开始随剂量增加而不断上升,20.0ng/mL乳酸脱氢酶逸出达到90%以上,细胞膜严重受损。受试8种传代细胞株无论从剂量、反应时间上都不如原代肝细胞敏感,其中相对敏感的KB细胞在培养96h,毒素浓度大于18.8μg/mL时,开始呈现明显剂量-反应关系,与原代肝细胞相差3个数量级。结论原代肝细胞是研究微囊藻毒素-LR急性毒性的理想模型,而KB细胞在较高剂量下可能是研究该毒素的传代细胞模型,其他传代细胞不适宜作为该毒素研究的模型。

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毒理学

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