作者：吕欣; 俞卫锋; 黄盛东; 李泉; 龚德军内毒素受体tlr4基因多态性基因型等位基因
摘要：目的:建立一种用于内毒素受体TLR4基因多态性"Asp299Gly" 检测的方法,并在中国汉族人中进行该位点的检测.方法:以等位基因特异性PCR原理为基础,在两个等位基因特异性引物的3′端第3位引入不配对碱基以增加特异性,与共同的下游引物分别构成两个PCR反应体系.采用PCR定点突变方法得到含和不含"Asp299Gly"突变位点的DN段插入质粒作为标准模板,用以验证这一方法的鉴别效果,并采用PCR-RFLP分析和测序加以验证.结果:该方法用于"Asp299Gly"检测的结果,与PCR-RFLP分析的结果及测序的结果完全相符,采用我们建立的已知基因型的突变型和野生型重组质粒作模板验证,结果也完全相符.采用该方法共检测92份汉族人群DNA 样本,未发现"Asp299Gly"的携带者.结论:以等位基因特异性PCR原理为基础的检测方法,是一种可用于TLR4基因多态性"Asp299Gly" 检测的简便、快速、准确、适合于一般实验室的好方法.中国汉族人群携带这一突变的基因频率可能很低.
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