大豆F-box基因Glyma08g11030启动子克隆及植物表达载体构建

作者：张承琪; 王怡; 夏成林; 于月华; 倪志勇大豆启动子克隆植物表达载体

摘要：本研究以大豆Williams 82的基因组DNA为原始材料,根据前期预测的Clyma08g11030启动子序列用DNAMAN8.0设计引物,通过常规PCR方法克隆获得了Clyma08g11030基因上游长度为3000 bp的启动子序列。在PlantCARE植物启动子区域在线预测网站上查询,预测的结果显示Glyma08g11030启动子序列里含有数量众多、功能各异的顺式作用元件。其中以TATA-box和CAAT-box这两个基本的顺式作用元件最多,此外还有许多与应答相关的顺式作用元件,如干旱、热、光、激素等。根据这些顺式作用元件在Glyma08g11030启动子序列中的位置对启动子序列进行截短并分别设计引物,采用PCR方法成功截出了3段长度分别为2492,1185和342 bp的启动子序列,将3段序列替换pCAMBIA3301载体双酶切出的CaMV35S启动子序列,并构建了3个启动子序列驱动GUS植物融合表达载体,从而得到含不同顺式作用元件的启动子序列。研究结果将为以后分析Clyma08g11030启动子的功能和作用机理提供前期准备。

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